Postnatal Exposure to Exogenous progesterone Exacerbates the Prenatally-Induced Abnormal Sperms Production and Function in Rats / La exposición Posnatal a la Progesterona Exógena Exacerba la Producción y Función Anormales de Espermatozoides Inducidas Prenatalmente en Ratas

SUMMARY: This study aimed at clarifying the impact of long-term prenatal and postnatal exposure to exogenous progesterone on sperm production and function, relative sex organs weights, and the levels of the relevant hormones in rats. Sixty male Wistar rats were included and classified into three groups (n=20 in each). A test I group had mature rats born to dams treated with progesterone prenatally. A test II group included rats exposed to progesterone during prenatal as well as postnatal periods, and a control group had rats treated with a placebo (olive oil). The test groups revealed a significant reduction in sperm count, motility, and viability with higher abnormal forms than the control group (P< 0.05). Similarly, the test groups revealed significantly lower serum testosterone and higher FSH and LH levels (P< 0.001). Interestingly, the test II group showed pronounced sperm abnormalities, an alarming decrease in sperm viability and motility, and a significant accretion in the relative testicular weight compared to the test I group (p <0.001). Long-term (prenatal and early postnatal) treatment with synthetic progesterone hurts sperm quantity and quality, adversely affecting future male fertility.

Este estudio tuvo como objetivo aclarar el impacto de la exposición prenatal y posnatal a largo plazo a la progesterona exógena en la producción y función de los espermatozoides, el peso relativo de los órganos sexuales y los niveles de las hormonas relevantes en ratas. Sesenta ratas macho Wistar fueron incluidas y clasificadas en tres grupos (n=20 en cada uno). Un grupo de prueba I tenía ratas maduras nacidas de madres tratadas con progesterona prenatalmente. Un grupo de prueba II incluyó ratas expuestas a progesterona durante los períodos prenatal y posnatal, y un grupo de control tenía ratas tratadas con un placebo (aceite de oliva). Los grupos de prueba revelaron una reducción significativa en el recuento, la motilidad y la viabilidad de los espermatozoides con formas anormales más altas que el grupo de control (P < 0,05). De manera similar, los grupos de prueba revelaron niveles significativamente más bajos de testosterona sérica y niveles más altos de FSH y LH (P < 0.001). Curiosamente, el grupo de prueba II mostró anormalidades espermáticas pronunciadas, una disminución alarmante en la viabilidad y motilidad de los espermatozoides y una acumulación significativa en el peso testicular relativo en comparación con el grupo de prueba I (p <0.001). El tratamiento a largo plazo (prenatal y posnatal temprano) con progesterona sintética daña la cantidad y la calidad del esperma, lo que afecta negativamente la futura fertilidad masculina.

Efecto regenerador gástrico del consumo de Petroselinum sativum L. (perejil) en ratas con gastritis inducida por etanol

El objetivo del presente trabajo fue determinar el efecto regenerador gástrico del consumo de Petroselinum sativum L. (perejil) en ratas con gastritis inducida por etanol. Se realizó un estudio analítico, experimental clásico, transversal, prospectivo. Se trabajó con 36 ratas Wistar machos (250 ± 30 g.p.c.) distribuidas aleatoriamente en 6 grupos (n=6). Los grupos II-VI fueron sometidos a ayuno de 24 horas para inducirles úlcera gástrica administrándoles 10 mL/kg.p.c. de etanol al 70% vía orogástrica. Después de una hora, se procedió a sacrificar al grupo II para observar el daño ulceroso en el estómago. Después, se elaboró el extracto acuoso de hojas frescas de perejil (EAHP) y se administró a los demás grupos el siguiente tratamiento por vía orogástrica durante 3 días: grupo III, 10 mL/kg.p.c. de solución de NaCl al 0,9%; y EAHP a los grupos IV-VI (150, 300 y 600 mg/kg.p.c., respectivamente). Enseguida, las ratas fueron sometidas a ayuno de 24 horas para luego ser sacrificadas por desnucamiento. Posteriormente, se les realizó una laparotomía para la extracción del estómago. El EAHP generó mayor producción de moco gástrico en las dosis de 300 mg/kg.p.c. con 78,03% y de 600 mg/kg.p.c. con 80,52% (p<0,05). Esto concordó con lo observado histológicamente en la mucosa gástrica, mostrando solo signos de inflamación de la submucosa en los grupos que consumieron EAHP (IV-VI), en comparación con necrosis fibrinoide de los grupos que no lo consumieron (II y III). En conclusión, el consumo de EAHP tiene un efecto regenerador gástrico en ratas con gastritis inducida por etanol.

Our objective is to determine the gastric regenerative effect of Petroselinum sativum L. (parsley) consumption in rats with ethanolinduced gastritis. We developed an analytical, experimental, classical, cross-sectional, prospective study. We worked with 36 male Wistar rats (250 ± 30 g.p.c.) randomly distributed into 6 groups (n=6). Groups II-VI were subjected to a 24-hour fast to induce gastric ulcer by administering 10 mL/kg.p.c. of 70% ethanol via orogastric. After one hour, group II was sacrificed to observe the ulcerative damage in the stomach. Afterward, the aqueous extract of fresh parsley leaves (EAHP) was prepared, and the following treatment was administered to the other groups through the orogastric route for 3 days: group III, 10 mL/kg.p.c. 0.9% NaCl solution; and EAHP to groups IV-VI (150, 300, and 600 mg/Kg.p.c., respectively). The rats were then fasted for 24 hours before being sacrificed by breaking their necks. Subsequently, a laparotomy was performed to extract the stomach. The EAHP generated greater production of gastric mucus in the doses of 300 mg/kg.p.c. with 78.03% and 600 mg/kg.p.c. with 80.52% (p<0.05). This was consistent with what was observed histologically in the gastric mucosa, showing only signs of inflammation of the submucosa in the groups that consumed EAHP (IV-VI), compared with fibrinoid necrosis in the groups that did not consume it (II and III). In conclusion, the consumption of EAHP has a gastric regenerative effect in rats with ethanol-induced gastritis.

Indicadores morfométricos de la corteza cerebral frontal de gazapos de ratas Wistar con diabetes pregestacional

Introducción: La diabetes es una enfermedad que afecta el embarazo provoca complicaciones fetales; dentro de ellas son frecuentes las malformaciones congénitas. Por la imposibilidad práctica y ética de estudiar este proceso en gestantes es imprescindible realizar estudios experimentales empleando procedimientos morfométricos para determinar si la diabetes afecta el neurodesarrollo. Objetivo: Caracterizar morfométricamente la sustancia gris de gazapos de ratas Wistar normales y con diabetes mellitus pregestacional. Métodos: Se realizó un estudio experimental básico de serie de casos a 20 gazapos de ratas Wistar de los cuales 10 eran descendientes de diabetes pregestacional. Se caracterizaron indicadores morfométricos del tejido nervioso como espesor de corteza e indicadores nucleares como el perímetro. Resultados: La media de la altura de la sustancia gris cortical mostró un valor de 1,224 ± 303,7 μm para el grupo control y 1,014 ± 376,0 para los casos, al aplicar el test de diferencias de medias se encontró diferencia significativa (p ≤ 0,05) a favor del grupo control. Los valores de la media del perímetro nuclear en el grupo control fue de 42,80 ± 7,23 μm y en el grupo experimental el promedio fue de 39,68 ± 6,52 μm, al aplicar el test de diferencias de medias se encontró diferencia significativa (p ≤ 0,05) a favor del grupo control al presentar mayor perímetro nuclear. Conclusiones: El mayor espesor cortical y perímetro nuclear correspondió al grupo control evidenciándose el efecto deletéreo de la diabetes mellitus en el neurodesarrollo.

Introduction: Diabetes is a disease that affects pregnancy causing fetal complications; within them congenital malformations are frequent. Due to the practical and ethical impossibility of studying this process in pregnant women, it is essential to carry out experimental studies using morphometric procedures to determine if diabetes affects neurodevelopment. Objective: To characterize morphometrically the gray matter of kits from normal Wistar rats and those with pregestational diabetes mellitus. Methods: A basic experimental study of a series of cases was carried out on 20 young Wistar rats, of which 10 were descendants of pregestational diabetes. Morphometric indicators of the nervous tissue were characterized as thickness of the cortex and nuclear indicators such as perimeter. Results: The average height of the cortical gray matter showed a value of 1.224 ± 303.7 μm for the control group and 1.014 ± 376.0 μm for the cases. When applying the mean difference test, a significant difference was found (p ≤ 0.05) in favor of the control group. The values of the measurement of the nuclear perimeter in the control group was 42.80 ± 7.23 μm and in the experimental group the average was 39.68 ± 6.52 μm. When applying the mean different test, a significant difference was found (p ≤ 0.05) at favor of control group presenting greater nuclear perimeter. Conclusions: The greatest cortical thickness and nuclear perimeter corresponded to the control group, evidencing the deleterious effect os diabetes mellitus on neurodevelopment.

Rattus norvegicus infectados com Trypanosoma cruzi: efeitos clínicos do tratamento com Lycopodium clavatun e phosphorus ultradiluídos / Rattus norvegicus infected with Trypanosoma cruzi: clinical effects of treatment with highly diluted Lycopodium clavatun and phosphorus / Rattus norvegicus infectado con Trypanosoma cruzi: efectos clínicos del tratamiento con Clavatun licopodio altamente diluido y fósforo

A doença de Chagas causada pelo parasita Trypanosoma cruzi acomete milhões de pessoas no mundo e não conta com um medicamento de ação efetiva para o seu tratamento etiológico. As drogas disponíveis, o nifurtimox e o benznidazol possuem índices de cura baixos com efeitos colaterais e toxidade que dificultam a adesão dos pacientes à terapia. Este fato impulsiona a busca por alternativas de tratamento que sejam mais efetivas e menos agressivas. Sendo assim, este trabalho teve como objetivo a avaliação dos efeitos clínicos apresentados por Rattus norvergicus infectados por T. cruzi e tratados com soluções ultradiluídas de Lycopodium clavatum ou Phosphorus. O estudo envolveu 93 ratos com quarenta e cinco dias de idade infectados intraperitonealmente com 5x106 formas tripomastigotas sanguíneos da cepa Y de T. cruzi, distribuídos nos grupos: Sadio SD (n=13) - controle não infectado e não tratado, grupo CI (n=27) - controle infectado e tratado com solução hidroalccólica 7% (etanol ­ água), grupo LY diluição 1:1x1026 (n=27) - infectado e tratado com Lycopodium, grupo PH diluição 1:1x1026 (n=26) - infectado e tratado com Phosphorum. Os animais foram avaliados clinicamente através dos parâmetros peso, temperatura, consumo de água e ração, quantidade de excretas, diâmetro e comprimento intestinal, aspecto da pelagem e consistência das fezes. Este estudo mostrou que os parâmetros utilizados foram importantes para a definição clínica da infecção de Rattus novergicus, linhagem Wistar pelo T. cruzi. Mostrou que os medicamentos LY e PH apresentam efeitos benéficos na evolução da clínica dos animais tratados. A utilização de Lycopodium clavatum e Phosphorus diluídos na proporção de 1:1x1026, apresentaram efeitos diferentes. Oito e seis parâmetros de quatorze analisados mostraram efeitos positivos para LY e PH, respectivamente. Os parâmetros consumo de água e ração, quantidade de excretas, diarreia, alopecia difusa e comprimento intestinal apresentaram diferenças significativas em relação ao controle infectado mostrando que mais estudos são necessários com o uso de medicamentos ultradiluídos na infecção pelo T. cruzi.

Chagas disease caused by the parasite Trypanosoma cruzi affects millions of people worldwide and does not have an effective drug for its etiological treatment. The available drugs, nifurtimox and benznidazole, have low cure rates with side effects and toxicity that make it difficult for patients to adhere to therapy. This fact drives the search for treatment alternatives that are more effective and less aggressive. Therefore, this work aimed to evaluate the clinical effects presented by Rattus norvergicus infected by T. cruzi and treated with ultradiluted solutions of Lycopodium clavatum or Phosphorus. The study involved 93 forty five day old rats intraperitoneally infected with 5x106 blood trypomastigotes forms of the Y strain of T. cruzi, distributed in the following groups: Healthy SD (n=13) - non-infected and untreated control, CI group (n =27) - infected control and treated with 7% hydroalcoholic solution (ethanol ­ water), LY group dilution 1:1x1026 (n=27) - infected and treated with Lycopodium, PH group dilution 1:1x1026 (n=26) - infected and treated with Phosphorum. The animals were clinically evaluated through the parameters weight, temperature, water and feed consumption, amount of excreta, intestinal diameter and length, coat appearance and feces consistency. This study showed that the parameters used were important for the clinical definition of infection of Rattus novergicus, Wistar lineage by T. cruzi. It showed that LY and PH drugs have beneficial effects on the clinical evolution of treated animals. The use of Lycopodium clavatum and Phosphorus diluted in the ratio of 1:1x1026, showed different effects. Eight and six parameters out of fourteen analyzed showed positive effects for LY and PH, respectively. The parameters water and feed consumption, amount of excreta, diarrhea, diffuse alopecia and intestinal length showed significant differences in relation to the infected control, showing that more studies are needed with the use of ultradiluted drugs in T. cruzi infection.

La enfermedad de Chagas causada por el parásito Trypanosoma cruzi afecta a millones de personas en todo el mundo y no cuenta con un fármaco eficaz para su tratamiento etiológico. Los fármacos disponibles, nifurtimox y benznidazol, presentan bajas tasas de curación con efectos secundarios y toxicidad que dificultan la adherencia terapéutica de los pacientes. Este hecho impulsa la búsqueda de alternativas de tratamiento más eficaces y menos agresivas. Por lo tanto, este trabajo tuvo como objetivo evaluar los efectos clínicos presentados por Rattus norvergicus infectados por T. cruzi y tratados con soluciones ultradiluidas de Lycopodium clavatum o Fósforo. En el estudio participaron 93 ratas de cuarenta y cinco días de edad infectadas intraperitonealmente con 5x106 formas tripomastigotes sanguíneas de la cepa Y de T. cruzi, distribuidos en los siguientes grupos: SD sano (n=13) - control no infectado y no tratado, grupo CI (n =27) - control infectado y tratado con solución hidroalcohólica al 7% (etanol - agua), grupo LY dilución 1:1x1026 (n=27) - infectado y tratado con Lycopodium, grupo PH dilución 1:1x1026 (n=26) - infectado y tratado con Phosphorum. Los animales fueron evaluados clínicamente mediante los parámetros peso, temperatura, consumo de agua y pienso, cantidad de excrementos, diámetro y longitud intestinal, aspecto del pelaje y consistencia de las heces. Este estudio demostró que los parámetros utilizados eran importantes para la definición clínica de la infección de Rattus novergicus, linaje Wistar por T. cruzi. Demostró que los fármacos LY y PH tienen efectos beneficiosos en la evolución clínica de los animales tratados. El uso de Lycopodium clavatum y Phosphorus diluidos en la proporción de 1:1x1026, mostró efectos diferentes. Ocho y seis parámetros de los catorce analizados mostraron efectos positivos para LY y PH, respectivamente. Los parámetros consumo de agua y pienso, cantidad de excretas, diarrea, alopecia difusa y longitud intestinal mostraron diferencias significativas en relación al control infectado, mostrando que son necesarios más estudios con el uso de fármacos ultradiluidos en la infección por

Daño en la pared arterial de las ratas Wistar sometidas a dieta hiperglucídica / Arterial wall damage in Wistar rats subjected to a hyperglycemic diet

RESUMEN Introducción: Los modelos experimentales en animales proporcionan una valiosa información para comprender los procesos fisiopatológicos de las lesiones de los vasos sanguíneos y sus consecuencias. Objetivo: Analizar los cambios histológicos y morfométricos que se observaron en la aorta abdominal de las ratas Wistar sometidas a una dieta hiperglucídica. Métodos: Se formaron aleatoriamente dos grupos experimentales de 10 animales cada uno. El grupo control alimentado con dieta estándar para la especie, y el grupo experimental alimentado con dieta estándar más sacarosa al 35 %, como agua de bebida desde el destete hasta las 20 semanas de vida. El estudio se realizó en muestras de aorta fijadas y procesadas por la técnica clásica de inclusión en parafina y coloreadas con las técnicas de hematoxilina - eosina y Verhoeff. Se realizó la descripción de las capas de la pared arterial y la determinación de variables morfométricas en cada lámina histológica. Resultados: Las ratas Wistar pertenecientes al grupo experimental desarrollaron modificaciones incipientes en la pared arterial de la aorta abdominal, las cuales corresponden con la presencia de tumefacción en la célula endotelial y vacuolización en la célula muscular lisa vascular, así como marcada desorganización de las fibras elásticas y musculares de la capa media. Las variables morfométricas que mostraron diferencias significativas entre los grupos fueron el grosor de la túnica media y el cociente media/ lumen. Conclusiones: La pared media resultó ser la capa más afectada demostrándose el efecto nocivo de la dieta hiperglucídica en la pared arterial.

ABSTRACT Introduction: experimental animal models provide valuable information to understand the physiological and pathological processes of blood vessel injuries and their consequences. Objective: to analyze the histological and morphometric changes observed in the abdominal aorta of Wistar rats subjected to a hyperglycemic diet. Methods: two experimental groups of 10 animals each were randomly formed. The control group was fed with a standard diet for this species, and the experimental group was fed with a standard diet plus 35% sucrose, as drinking water from weaning to 20 weeks of life. The study was performed on aortic samples fixed and processed by the classic paraffin embedding technique and stained with the hematoxylin-eosin and Verhoeff techniques. The description of the layers of the arterial wall and the determination of morphometric variables in each histological slide were made. Results: the Wistar rats belonging to the experimental group developed incipient changes in the arterial wall of the abdominal aorta, which correspond to the presence of endothelial cell swelling and vacuolation in the vascular smooth muscle cell, as well as marked disorganization of the muscle and elastic fibers of the middle layer. The morphometric variables that showed significant differences between the groups were the thickness of the tunica media and the media/lumen ratio. Conclusions: the middle wall turned out to be the most affected layer, demonstrating the harmful effect of the hyperglycemic diet on the arterial wall.

Relación del ácido fólico y los defectos del tubo neural en ratas Wistar / Relationship of folic acid and neural tube defects in Wistar rats

RESUMEN Introducción: los defectos del cierre del tubo neural son anomalías del sistema nervioso central superadas únicamente por los defectos cardíacos. En Pinar del Río existe un aumento de interrupciones de embarazo por diagnóstico de este defecto, se desconoce si los niveles de ácido fólico en las gestantes influyen en su incidencia. Objetivo: corroborar la relación entre los defectos del cierre del tubo neural en las crías de ratas Wistar y las dosis de ácido fólico administrada en las ratas Wistar gestadas. Métodos: se realizó un estudio experimental en ratas Wistar, se formaron cinco grupos de dos ratas hembras, dos que recibieron dosis de ácido fólico de 100 y 200 microgramos (µg) antes y durante la gestación, dos que recibieron 100 y 200 µg durante la gestación y un grupo control que no recibió ninguna dosis. La muestra estuvo constituida por 212 ratas recién nacidas, sacrificadas bajo normas internacionales. Se extrajo médula y cerebro para observar las anomalías, se tomaron fotomicrografía de los cortes realizados. El nivel de significación para todas las comparaciones estadísticas fue α ≤ 0,05. Resultados: se observaron en total trece espinas bífidas, once en el grupo control (26,19 %) y dos (4,65 %) en el de 200 µg durante la gestación, al comparar el grupo control respecto a los grupos tratados, la variable masa corporal presentaron significación estadística. Se observó que la presencia de espina bífida fue significativa en la hembra con respecto al macho. Conclusiones: se demostró la necesidad esencial de la ingestión de ácido fólico antes y durante la gestación en ratas Wistar y la asociación de espina bífida y sexo, el sexo femenino fue el predominante.

ABSTRACT Introduction: neural tube closure defects are anomalies of the central nervous system surpassed only by cardiac defects. In Pinar del Rio province there is an increase of pregnancy interruptions due to diagnosis of this defect, and it is not known if folic acid levels in pregnant women influence its incidence. Objective: to corroborate the relationship between neural tube closure defects in Wistar rats' pups and the doses of folic acid administered in pregnant Wistar rats. Methods: an experimental study was carried out in Wistar rats, forming five groups of two female rats; two of them received doses of folic acid of 100 and 200 micrograms (µg) before and during gestation, two that received 100 and 200 µg during gestation and a control group that did not receive any dose. The sample consisted of 212 newborn rats, sacrificed under international standards. Marrow and brain were extracted to observe the anomalies, and photomicrographs were taken of the sections made. The significance level for all statistical comparisons was α ≤ 0,05. Results: a total of thirteen spina bifida were observed, eleven in the control group (26,19 %) and two (4,65 %) in the 200 µg group during gestation, when comparing the control group with the treated groups, the body mass variable presented statistical significance. It was observed that the presence of bifid spina was significant in the female with respect to the male. Conclusions: the essential need of folic acid ingestion before and during gestation in Wistar rats and the association of spina bifida and sex were confirmed, being predominant in the female sex.

Alteraciones genitales en la infección por leptospiras en ratas Wistar gestadas / Genital alterations in leptospiras infection in pregnant Wistar rats

RESUMEN Introducción: la leptospirosis en Cuba se presenta de forma endémica, y a veces de forma epidémica, por lo que es un problema de salud. Su efecto sobre los genitales internos, en gestantes, ha sido poco tratado por los investigadores. Objetivo: describir las principales alteraciones en los genitales internos de ratas Wistar gestadas infestadas por leptospiras. Métodos: se realizó un estudio experimental en ratas Wistar preñadas: siete grupos con tres animales cada uno: un control negativo y seis casos con dosis de una concentración bacteriana de 300 millones de Leptospiras por mL; se inocularon dos mililitros a cada animal al cuarto día de gestadas por 17 meses. Se tomaron los genitales internos de todas las ratas el día 20 de la gestación, estos fueron procesados en parafina y teñidos con hematoxilina/eosina. Resultados: se observaron alteraciones en útero, ovarios y trompas; el mayor número de lesiones se presentaron en útero mientras que en ovarios y trompas se visualizaron la misma cantidad de lesiones. Conclusiones: la leptospirosis infectó los genitales internos con la producción de quistes, necrosis, abscesos, ooforitis y microhemorragias en ovarios; congestión vascular y hemorragias en las trompas uterinas y endometritis, hemorragias, miometritis, piometristis, perimetritis y congestión vascular en el útero. Predominaron las alteraciones congestivas y hemorrágicas.

ABSTRACT Introduction: leptospirosis in Cuba occurs endemically, and sometimes epidemically, making it a health problem. Its effect on internal genitalia in pregnant women has been little treated by researchers. Objective: to describe the main alterations in the internal genitalia of pregnant Wistar rats infested by leptospiras. Methods: an experimental study was carried out in pregnant Wistar rats: 7 groups with three animals each: 1 negative control and 6 cases with doses of a bacterial concentration of 300 million Leptospira per mL; each animal was inoculated with two milliliters on the fourth day of pregnancy for 17 months. The internal genitalia of all rats were taken on day 20 of gestation, processed in kerosene and stained with hematoxylin/eosin. Results: alterations were observed in the uterus, ovaries and tubes; the greatest number of lesions was present in the uterus while the same number of lesions was visualized in the ovaries and tubes. Conclusions: leptospirosis infected the internal genitalia producing cysts, necrosis, abscesses, oophoritis and microhemorrhages in the ovaries; vascular congestion and hemorrhages in the uterine tubes and endometritis, hemorrhages, myometritis, pyometristis, perimetritis and vascular congestion in the uterus. Congestive and hemorrhagic alterations predominated.

Effects of photobiomodulation (660 nm laser) on anthracycline extravasation: An experimental study / Efeitos da fotobiomodulação (laser 660 nm) no extravasamento de antraciclina: estudo experimental / Efectos de la fotobiomodulación (láser de 660 nm) sobre la extravasación de antraciclinas: estudio experimental

Abstract Objective: to investigate the effect of using different agents (topical hyaluronidase, photobiomodulation, and the association of photobiomodulation with topical hyaluronidase) in preventing the formation of lesions caused by doxorubicin extravasation, as well as in the reduction of lesions formed by extravasation of this drug. Method: a quasi-experimental study conducted with 60 Wistar rats, randomized into four groups with 15 animals each. Group 1 (Control); Group 2 (Hyaluronidase); Group 3 (Photobiomodulation); and Group 4 (Hyaluronidase + Photobiomodulation). A wound was induced by applying 1 mg of doxorubicin to the subcutaneous tissue of the back of the animals. The concentration of topical hyaluronidase was 65 turbidity units/g and the energy employed was 1 joule of 100 mW red laser per square centimeter. With macroscopic evaluation every two days for 28 days, the following variables were observed: skin integrity, presence of blisters, hyperemia, exudate, bleeding, edema, crust, peeling and granulation tissue. Results: the animals from the groups subjected to photobiomodulation obtained better results in the assessment of the following variables: bleeding, hyperemia, exudate, intact skin and edema. Conclusion: it was evidenced that the association of photobiomodulation with topical hyaluronidase was effective in reducing the local effects and assisted in the wound healing process, and that PBM alone was able to prevent appearance of lesions.

Resumo Objetivo: investigar o efeito do uso de diferentes agentes (hialuronidase tópica, fotobiomodulação e da associação da fotobiomodulação com a hialuronidase tópica) na prevenção de formação de lesões causadas por extravasamento de doxorrubicina bem como na diminuição de lesões formadas pelo extravasamento desta droga. Método: estudo experimental com 60 ratos Wistar, randomizados em quatro grupos de 15 animais. Grupo 1 (Controle); Grupo 2 (Hialuronidase); Grupo 3 (Fotobiomodulação) e Grupo 4 (Hialuronidase + Fotobiomodulação). Induziu-se ferida aplicando 1 mg de doxorrubicina no subcutâneo do dorso dos animais. A concentração da hialuronidase tópica foi de 65 unidades de turbidez/g, a energia empregada foi de 1 joule de laser vermelho 100 mW por centímetro quadrado. Com avaliação macroscópica a cada dois dias por 28 dias, observou-se as variáveis: integridade da pele, presença de flictema, hiperemia, exsudato, sangramento, edema, crosta, descamação e tecido de granulação. Resultados: os animais dos grupos com fotobiomodulação obtiveram melhores resultados na avaliação das variáveis: sangramento, hiperemia, exsudato, pele íntegra e edema. Conclusão: evidenciou-se que a associação da fotobiomodulação com a hialuronidase tópica foi eficaz na diminuição dos efeitos locais e auxiliou no processo de cicatrização da ferida e que a FBM isolada foi capaz de prevenir o aparecimento de lesões.

Resumen Objetivo: investigar el efecto del uso de diferentes agentes (hialuronidasa tópica, fotobiomodulación y la combinación de fotobiomodulación y hialuronidasa tópica) en la prevención de la formación de lesiones causadas por la extravasación de doxorrubicina y en la reducción de las lesiones formadas por la extravasación de ese fármaco. Método: estudio experimental con 60 ratas Wistar, distribuidos aleatoriamente en cuatro grupos de 15 animales. Grupo 1 (Control); Grupo 2 (Hialuronidasa); Grupo 3 (Fotobiomodulación) y Grupo 4 (Hialuronidasa + Fotobiomodulación). La herida se indujo aplicando 1 mg de doxorrubicina por vía subcutánea en el lomo de los animales. La concentración de hialuronidasa tópica fue de 65 unidades de turbidez/g, la energía utilizada fue de 1 joule de láser rojo de 100 mW por centímetro cuadrado. En la evaluación macroscópica cada dos días durante 28 días se observaron las siguientes variables: piel intacta, presencia de flictena, hiperemia, exudado, sangrado, edema, costra, descamación y tejido de granulación. Resultados: los animales de los grupos con fotobiomodulación obtuvieron mejores resultados en la evaluación de las variables: sangrado, hiperemia, exudado, piel intacta y edema. Conclusión: se demostró que la combinación de fotobiomodulación y hialuronidasa tópica fue eficaz para reducir los efectos locales y ayudó en el proceso de cicatrización de heridas y que la FBM por sí sola previno la aparición de lesiones.

Regenerating effect of hyaluronic acid on circumferential bone defects in wistar albino rats / Efecto regenerador del ácido hialurónico en defectos óseos circunferenciales en ratas albinas wistar

Objective: To determine the regenerating effect of hyaluronic acid on circumferential bone defects in albino Wistar rats. Material and Methods: An experimental type study was designed and carried out with 15 albino male Wistar rats, 4 months old and weighing between 250 and 350 grams. Two circumferential bone defects 3mm in diameter and 0.8mm deep were created in the calvaria of the parietal bone (on both sides of the midline). One defect was filled with a demineralized bone matrix (control group); while the other defect was filled with the combination of a demineralized bone matrix plus hyaluronic acid (experimental group). Five experimental rats were euthanized at 30, 60 and 90 days after surgery and they were histologically evaluated following the parameters proposed by Heiple. Results: The experimental group presented a better degree of bone regeneration at 30 and 60 postoperative days. Conclusion: Hyaluronic acid is effective in bone regeneration of circumferential bone defects.

Objetivo: Determinar el efecto regenerador del ácido hialurónico en defectos óseos circunferenciales en ratas albinas Wista. Material y Métodos: Se diseñó un estudio de tipo experimental y se trabajó con 15 ratas albinas Wistar (todas macho) de 4 meses de edad y con un peso entre 250 a 350 gr. Se crearon en todas 2 defectos óseos circunferenciales de 3mm de diámetro y 0.8 mm de profundidad en la calota del hueso parietal (a ambos lados de la línea media). Un defecto fue rellenado con una matriz ósea desmineralizada (grupo control); mientras que el otro defecto fue rellenado con la combinación de una matriz ósea desmineralizada más el ácido hialurónico (grupo experimental). Se realizó la eutanasia a 05 ratas de experimentación a los 30, 60 y 90 días postquirúrgicos y se evaluaron histológicamente siguiendo los parámetros propuestos por Heiple. Resultados: El grupo experimental presentó un mejor grado de regeneración ósea en los 30 y 60 días postoperatorios. Conclusiones: El ácido hialurónico es eficaz en la regeneración ósea de defectos óseos circunferenciales.

Dinámica contráctil espontánea del músculo liso vascular de la arteria carótida externa / Spontaneous contractile dynamics of the vascular smooth muscle of the external carotid artery

Introducción: La carótida externa es una arteria muscular que irriga todos los componentes del sistema masticatorio, por lo que la regulación de la dinámica contráctil de su músculo liso vascular es imprescindible para garantizar el tono y el flujo sanguíneo tisular y modular la respuesta inflamatoria. Objetivo: Describir la dinámica contráctil espontánea del musculo liso vascular de la arteria carótida externa. Métodos: Se realizó una investigación experimental en el Instituto de Fisiología Oscar Langerdorff de la Facultad de Medicina, en la Universidad de Rostock, Alemania, de octubre a diciembre del 2018, en la cual se utilizaron 60 anillos de arterias carótidas externas obtenidas de 10 ratas Wistar adultas de ambos sexos. A dichos anillos se les practicó un corte helicoidal y fueron colocados en un baño de órganos, para registrarles, luego, la tensión espontánea desarrollada por el músculo liso vascular contra una carga de 1 gramo, durante diferentes intervalos de tiempo. Resultados: Los registros de la actividad contracción-relajación espontánea del músculo liso vascular de la arteria carótida externa fluctuaron dentro de un rango estrecho de cifras de tensión, con valores máximos de 8,48 ± 0,03 y mínimos de 8,33 ± 0,03, y una diferencia de 0,08 mN/g de músculo. Los valores promedios de tensión en cada intervalo de tiempo fueron muy cercanos, con desviaciones estándar que evidenciaron muy poca dispersión de los datos respecto a la media. La tensión promedio general registrada fue de 8,40 ± 0,032 mN/g. Conclusiones: La dinámica contráctil espontánea desarrollada por el músculo liso vascular de la arteria carótida externa mostró una progresión irregular en el tiempo, con valores promedios de tensión que oscilaron entre 5-10 mN/g de músculo.

Introduction: The external carotid is a muscle artery irrigating all components of the masticatory system, so that the regulation of the contractile dynamics of its vascular smooth muscle is important. Objective: To describe the spontaneous contractile dynamics of the vascular smooth muscle of the external carotid artery. Methods: An experimental investigation was carried out in the Oscar Langerdorff Physiology Institute from the Medicine Faculty at Rostock University, Germany, from October to December 2018, in which 60 rings of the external carotid artery obtained from 10 adult Wistar rats from both sexes. An helical cut was made to each ring and they were placed in an organ bath, to be registered, then, the spontaneous strain developed by the vascular smooth muscle against a charge of 1 g, during different time intervals was registered. Results: The records from the spontaneous contraction-relaxation of the vascular smooth muscle in the external carotid artery fluctuated within a narrow range of strain figures, with maximum values of 8.48 ± 0.03 and minimum of 8.33 ± 0.03, and a difference of 0.08 mN/g of muscle. Average strain values in each time interval were very closed, with standard deviations which evidenced a very small data dispersion regarding the mean. The average general registered strain was 8.40 ± 0.032 mN/g. Conclusions: The spontaneous contractile dynamics developed by the vascular smooth muscle of the external carotid artery showed an irregular progression in time, with average strain values fluctuating between 5-10 mN/g of muscle.

Protocolo para la citología vaginal directa de ratas de laboratorio / Protocol for direct vaginal cytology of laboratory rats

Introducción: La citología vaginal directa es un método muy utilizado para la evaluación del ciclo estral de las ratas de laboratorio, pero la información acerca de los procedimientos e interpretación de los resultados aparece disgregada en la literatura, lo cual dificulta su empleo en los estudios de reproducción. Objetivo: Proponer un protocolo para la realización de la citología vaginal directa de ratas de laboratorio y la interpretación de los resultados. Material y métodos: Se combinó la información de la literatura y la experiencia de 10 años de estudios de reproducción, en los que se han empleado un total de 250 ratas Wistar hembras, siguiendo preceptos éticos establecidos. Se describen los procedimientos para la obtención de las muestras, mediante lavado vaginal, así como para su observación y análisis en estado húmedo, con microscopio óptico y cámara digital acoplada. Resultados: Se describen los tipos celulares principales presentes en el lavado vaginal y las características que permiten identificar cada fase o estado de transición del ciclo estral. Se discuten aspectos a considerar en la interpretación de los resultados, que incluye la relación con los cambios hormonales, los cuidados en la obtención de la muestra y la influencia de factores ambientales. Se muestran imágenes y figuras representativas para ilustrar el texto. Conclusiones: El trabajo constituye un protocolo para el estudio del ciclo estral de ratas de laboratorio, mediante la citología vaginal directa. Provee métodos no invasivos, sencillos y económicos, así como conocimientos esenciales para la interpretación de los resultados, que integran una guía de gran utilidad para los estudios experimentales de reproducción(AU)

Introduction: Direct vaginal cytology is a widely used method for the evaluation of the estrous cycle of laboratory rats, but the information about the procedures and interpretation of results is dispersed through literature, making its use difficult in investigations on reproduction. Objective: To propose a protocol for performing direct vaginal cytology of laboratory rats as well as for the interpretation of the results. Material and methods: The information obtained from literature and the experience of 10 years of investigation on reproduction in 250 female Wistar rats were combined following the established ethical principles. The procedures for obtaining samples by vaginal washing and by observation and analysis in humid state with light microscope equipped with digital camera were described. Results: The main types of cells present in the vaginal washing and the characteristics that allow us to identify each phase or transitional phases of the estrus cycle are described. Aspects to take into consideration in the interpretation of the results, which include the association between hormonal changes, the cares in the obtaining of the sample and the influence of environmental factors, are discussed. Representative images and figures are included to illustrate the text. Conclusions: The work consists of a study protocol of the estrus cycle of laboratory rats by direct vaginal cytology. It provides noninvasive, simple and cost-reducing procedures as well as essential knowledge for the interpretation of results which integrate a very useful guideline for experimental investigations on reproduction(AU)

Microscopic and molecular evaluation of Strongyloides venezuelensis in an experimental life cycle using Wistar rats / Evaluación microscópica y molecular de Strongyloides venezuelensis en un ciclo de vida experimental utilizando ratas Wistar

Abstract | Introduction: Strongyloides venezuelensis is a nematode whose natural host is rats. It is used as a model for the investigation of human strongyloidiasis caused by S. stercoralis. The latter is a neglected tropical disease in Ecuador where there are no specific plans to mitigate this parasitic illness. Objective: To evaluate the stages of S. venezuelensis in an experimental life cycle using Wistar rats. Materials and methods: Male Wistar rats were used to replicate the natural biological cycle of S. venezuelensis and describe its morphometric characteristics, as well as its parasitic development. Furthermore, the production of eggs per gram of feces was quantified using two diagnostic techniques and assessment of parasite load: Kato-Katz and qPCR. Results: Viable larval stages (Lr L2, L3) could be obtained up to 96 hours through fecal culture. Parthenogenetic females were established in the duodenum on the fifth day postinfection. Fertile eggs were observed in the intestinal tissue and fresh feces where the production peak occurred on the 8th. day post-infection. Unlike Kato-Katz, qPCR detected parasitic DNA on days not typically reported. Conclusions: The larval migration of S. venezuelensis within the murine host in an experimental environment was equivalent to that described in its natural biological cycle. The Kato-Katz quantitative technique showed to be quick and low-cost, but the qPCR had greater diagnostic precision. This experimental life cycle can be used as a tool for the study of strongyloidiasis or other similar nematodiasis.

Resumen | Introducción. Strongyloides venezuelensis es un nematodo cuyo huésped natural son las ratas. Se utiliza como modelo para la investigación de la estrongiloidiasis humana producida por S. stercoralis. Esta última es una enfermedad tropical desatendida que afecta al Ecuador, donde no existen planes específicos para mitigar esta parasitosis. Objetivo. Evaluar experimentalmente los estadios del ciclo de vida de S. venezuelensis utilizando ratas Wistar. Materiales y métodos. Se emplearon ratas Wistar macho para replicar el ciclo biológico natural de S. venezuelensis y describir sus características morfométricas y su desarrollo parasitario. Además, se cuantificó la producción de huevos por gramo de heces mediante dos técnicas de diagnóstico y valoración de carga parasitaria: Kato-Katz y qPCR. Resultados. Se obtuvieron estadios larvarios viables (L1, L2, L3) hasta las 96 horas del cultivo fecal. En el duodeno se establecieron hembras partenogenéticas a partir del quinto día de la infección. Se observaron huevos fértiles en el tejido intestinal inspeccionado y en las heces frescas, en las que el pico de producción ocurrió al octavo día de la infección. A diferencia del método Kato-Katz, la qPCR detectó ADN parasitario en días que usualmente no se reportan. Conclusiones. La migración larvaria de S. venezuelensis dentro del ratón en un ambiente experimental fue equivalente al descrito en un ciclo biológico natural. El método cuantitativo de Kato-Katz dio resultados inmediatos a más bajo costo, pero la qPCR tuvo mayor precisión diagnóstica. Este ciclo de vida experimental puede usarse como una herramienta para el estudio de la estrongiloidiasis u otras nematodiasis similares.

Effects of photobiomodulation on wound contraction in rats undergoing doxorubicin extravasation: a histomorphometric analysis / Efectos de la fotobiomodulación en la contracción de heridas en ratones sometidos a la extravasación de doxorrubicina: análisis histomorfométrico / Efeitos da fotobiomodulação na contração de feridas em ratos submetidos ao extravasamento de doxorrubicina: análise histomorfométrica

ABSTRACT Objective: To analyze wound contraction and histomorphometric pattern of lesions in Wistar rats undergoing doxorubicin extravasation. Method: Sixty adult female rats were used, divided into four groups of fifteen animals: Group 1 (Control, without antidote); Group 2 (Hyaluronidase); Group 3 (Photobiomodulation), and Group 4 (Hyaluronidase + Photobiomodulation). Doxorubicin 1mg (0.5 ml) was applied subcutaneously on the animals' back, inducing the wound. Macroscopic and morphometric evaluation of the lesions was performed every two days for 28 days. On the 30th day, euthanasia was performed and the material was collected for histological evaluation. Results: The animals in the photobiomodulation and photobiomodulation + Hyaluronidase groups presented regeneration tissue with neovascularization and acute inflammation, with improvement in wound healing, which did not occur in the other groups. The contraction rates were better in those treated with photobiomodulation and photobiomodulation + Hyaluronidase, with healing percentages of 76.6% and 72.1%, respectively. Conclusion: The combination of photobiomodulation (660 nm-1 J) with topical hyaluronidase (65 UTR) proved to be effective in the process of wound healing due to extravasation of doxorubicin, and can be incorporated into the practice of clinical oncology.

RESUMEN Objetivo: Analizar la contracción de heridas y patrón histomorfométrico de las lesiones en ratones Wistar sometidos a la extravasación de doxorrubicina. Método: Fueron utilizadas 60 ratas adultas, divididas en cuatro grupos de quince animales: Grupo 1 (Control sin antídoto); Grupo 2 (Hialuronidasa); Grupo 3 (Fotobiomodulación) y Grupo 4 (Hialuronidasa + Fotobiomodulación). Se aplicó 1 mg (0,5 ml) de doxorrubicina en el subcutáneo del dorso de los animales, induciendo la herida. Realizada evaluación macroscópica y morfométrica de las lesiones cada dos días por 28 días. En el 30° día se realizó la eutanasia y recolección del material para evaluación histológica. Resultados: Los animales de los grupos fotobiomodulación y fotobiomodulación+ Hialuronidasa presentaron tejido de regeneración con neovascularización e inflamación aguda, con mejoría de la cicatrización de las heridas, lo que no ocurrió en otros grupos. Las tasas de contracción fueron mejores en los tratados con fotobiomodulación y fotobiomodulación + Hialuronidasa, con porcentaje de cicatrización de 76,6% y 72,1%, respectivamente. Conclusión: la combinación de la fotobiomodulación (660nm-1J) con hialuronidasa tópica (65 UTR) demostró ser más eficaz en el proceso de cicatrización de heridas por extravasación de doxorrubicina, lo que posibilitó adoptarla en la práctica de la oncología clínica.

RESUMO Objetivo: Analisar a contração de feridas e padrão histomorfométrico das lesões em ratos Wistar submetidos ao extravasamento de doxorrubicina. Método: Utilizados 60 ratos fêmeas adultos, divididos em quatro grupos de quinze animais: Grupo 1 (Controle, sem antídoto); Grupo 2 (Hialuronidase); Grupo 3 (Fotobiomodulação) e Grupo 4 (Hialuronidase + Fotobiomodulação). Aplicado 1 mg (0,5 ml) de doxorrubicina no subcutâneo do dorso dos animais, induzindo a ferida. Realizada avaliação macroscópica e morfométrica das lesões a cada dois dias por 28 dias. No 30º dia foi realizada a eutanásia e coleta do material para avaliação histológica. Resultados: Os animais dos grupos fotobiomodulação e fotobiomodulação+Hialuronidase apresentaram tecido de regeneração com neovascularização e inflamação aguda, com melhora na cicatrização das feridas, o que não ocorreu nos outros grupos. As taxas de contração foram melhores nos tratados com fotobiomodulação e fotobiomodulação + Hialuronidase, com percentual de cicatrização de 76,6% e 72,1%, respectivamente. Conclusão: A combinação da fotobiomodulação (660 nm-1 J) com hialuronidase tópica (65 UTR) mostrou-se eficaz no processo de cicatrização de feridas por extravasamento de doxorrubicina, podendo ser incorporada à pratica da oncologia clínica.

Reducción de la ingesta de alimento balanceado por consumo de agua endulzada con sacarosa en ratas Wistar / Reduction of balanced food intake by consumption of water sweetened with sucrose in Wistar rats

El azúcar de mesa, que se obtiene de la caña de azúcar, es el edulcorante más utilizado en la elaboración de los alimentos. El azúcar es importante en la obtención de energía, es necesario para la síntesis de ácidos grasos, de ácidos nucleicos, evita el estrés oxidativo y el desarrollo de anemia. Puede ocasionar caries, diabetes, obesidad, arteriosclerosis y otras patologías. En el presente trabajo se valoró el efecto que tiene la ingesta crónica de agua endulzada con sacarosa al 30% sobre el consumo de alimento balanceado, el perfil lipídico, la concentración de glucosa sérica, y sobre algunos marcadores del estado nutricional como el peso y las proteínas séricas totales, en machos de ratas Wistar. El agua endulzada con sacarosa al 30% se administró a un grupo de 9 ratas Wistar durante 3 meses y se tomó como grupo control a un grupo de 9 ratas que bebieron agua natural. El consumo de alimentos por ambos grupos, así como los marcadores de química sanguínea se analizaron al final del tratamiento. Los niveles de glucosa, lípidos y proteínas séricas totales se midieron mediante espectroscopía. Los resultados mostraron que el consumo de agua endulzada con sacarosa al 30% redujo en más de un 90% el consumo de alimento balanceado; sin embargo, no afectó el perfil lipídico ni el nivel de glucosa en sangre, así como tampoco el nivel de proteínas séricas totales. El consumo de agua endulzada con sacarosa podría provocar desnutrición a largo plazo ya que ocasiona una reducción en la ingesta de alimento rico en nutrientes.

Sugar, obtained from sugarcane, is the most commonly used sweetener in food processing. Sugar is an important food for energy generation and it is necessary for the synthesis of fatty acids and nucleic acids. It prevents oxidative stress and anemia development. However, its consumption can cause dental caries, diabetes, obesity, arteriosclerosis and other pathologies. In the present work, the effect of chronic intake of water sweetened with 30% sucrose on balanced food consumption, lipid profile, serum glucose concentration, as well as some markers of nutritional status such as weight and total serum proteins was assessed in male Wistar rats. The water sweetened with 30% sucrose was administered to a group of 9 Wistar rats for 3 months, having 9 rats as a control group that drank natural water. Food consumption between both groups as well as blood chemistry markers were analyzed at the end of the treatment. Glucose, lipid levels as well as total serum proteins were measured by spectroscopy. The results showed that the consumption of water sweetened with 30% sucrose reduced the consumption of balanced food by more than 90%, however, it did not affect the lipid profile, the level of glucose in the blood or the level of total serum proteins concentration. Consumption of sucrose-sweetened water could lead to long-term malnutrition by reducing the intake of nutrient-rich food.

O açúcar comum, obtido a partir da cana de açúcar, é o adoçante mais utilizado na elaboração dos alimentos. O açúcar é importante para a geração de energia; necessário para a síntese de ácidos graxos e de ácidos nucleicos. Previne o estresse oxidativo e o desenvolvimento de anemia. No entanto, seu consumo pode causar cárie dentária, diabetes, obesidade, arteriosclerose e outras patologias. No presente trabalho, foi avaliado o efeito da ingestão crônica de água adoçada com sacarose a 30% sobre o consumo de alimentos ricos em nutrientes, perfil lipídico, concentração sérica de glicose e alguns marcadores do estado nutricional, como o peso. e as proteínas séricas totais em ratos Wistar machos. A água adoçada com sacarose a 30% foi administrada a um grupo de 9 ratos Wistar por 3 meses, tendo como grupo controle um grupo de 9 ratos que beberam água natural. O consumo de alimentos entre os dois grupos e os marcadores de química sanguínea foram analisados no final do tratamento. Os níveis de glicose, lipídios e proteínas séricas totais foram medidos por espectroscopia. Os resultados mostraram que o consumo de água adoçada com sacarose a 30% reduziu em mais de 90% o consumo de alimentos ricos em nutrientes, no entanto, não afetou o perfil lipídico, o nível de glicose em sangue nem o nível de proteínas séricas totais. O consumo de água adoçada com sacarose poderia levar à desnutrição no longo prazo, visto que produz uma redução na ingestão de alimentos ricos em nutrientes.

Characterization of hippocampal histomorphology following R. vomitoria root extract treatment / Caracterización de la histomorfología del hipocampo después del tratamiento con extracto de la raíz de R. vomitoria

Rauwolfia vomitoria Afzel. is an antipsychotic plant used by several African communities in the management of psychiatric conditions with good outcomes. Concerns about its dosages on brain activity lead to this investigation of its action on the hippocampal microstructure.Twenty-four adult male Wistar rats of average weight 200 g, were assigned into four groups (n = 6): control; 200, 300 and 400 mg/kg body weight of RVroot bark extract, respectively. The administration was once daily, and orally for seven days. Daily observation of the animals was done till on day eight when they were sacrificed after deep anaesthesia. Each brain was processed for histology and immunohistochemical studies. Animals in the 200, 300 and 400 mg/kg RV groups appeared generally dull and drowsy, and barely fed. Their hippocampal histology showed neuronal atrophy and karyorrhexis, with no difference in cell count, although the pyramidal cell numbers decreased in the 300 and 400 mg/kg RV groups. Neuron-specific enolase decreased in the 400 mg/kg RV group, while neurofilament decreased in all test groups. Glial fibrillary acidic protein expression and density increased in the 200 and 300 mg/kg RV groups, but not the 400 mg/kg RV group, all compared with the control group.The given doses of RV root bark extractin adult Wistar rats showed sedative activities with hippocampal histopathological changes, which may not be reversible, thereby leading to the hippocampal functional deficit.

Introducción: Rauwolfia vomitoria (RV) Afzel es una planta antipsicótica utilizada por varias comunidades africanas en el tratamiento de enfermedades psiquiátricas con buenos resultados. Las preocupaciones sobre sus efecto sobre la actividad cerebral conducen a esta investigación de su acción sobre la microestructura del hipocampo.Materiales y métodos: Se asignaron veinticuatro ratas Wistar macho adultas de un peso medio de 200 g, en cuatro grupos (n = 6): control; 200, 300 y 400 mg / kg de peso corporal de extracto de corteza de raíz de RV, respectivamente. La administración fue una vez al día y por vía oral durante siete días. Se realizó una observación diaria de los animales hasta el día ocho, cuando fueron sacrificados después de una anestesia profunda. Cada cerebro fue procesado para estudios histológicos e inmunohistoquímicos.Resultados: Los animales en los grupos de RV de 200, 300 y 400 mg / kg parecían generalmente apagados y somnolientos, y apenas alimentados. Su histología hipocampal mostró atrofia neuronal y cariorrexis, sin diferencia en el recuento celular, aunque el número de células piramidales disminuyó en los grupos de RV de 300 y 400 mg / kg. La enolasa específica de neuronas disminuyó en el grupo de RV de 400 mg / kg, mientras que el neurofilamento disminuyó en todos los grupos de prueba. La expresión y densidad de la proteína fibrilar ácida glial aumentó en los grupos de RV de 200 y 300 mg / kg, pero no en el grupo de RV de 400 mg / kg, todos en comparación con el grupo de control.Conclusión: Las dosis administradas de extracto de corteza de raíz de RV en ratas Wistar adultas mostraron actividades sedantes, con cambios histopatológicos del hipocampo, que pueden no ser reversibles, lo que conduce al déficit funcional del hipocampo.

¿Puede el Líquıdo Amnıótıco Ser una Solucıón Alternatıva de Conservacıón de Órganos para el Almacenamıento Renal en Frío? / Can Amniotic Fluid Be an Alternative Organ Preservation Solution for Cold Renal Storage?

Abstract Introduction: Kidney-transplantation is a life-saving treatment option for patients with chronic renal failure. Preserving the viability of the organ from the removal of the organ until transplantation into the recipient is one of the most essential factors affecting postransplant success. Kidney tissue is exposed to ischemia following removal of the organ from the donor, initiating some cellular events. Amniotic fluid (AF) was previously reported as a preservation solution for the liver, but not for the kidney yet. The aim of this study is to investigate the effectiveness of AF as a preserving solution for rat kidneys compared with the University of Wisconsin (UW) and Histidine-Tryptophan-Ketoglutarate (HTK), which are reported to be the most commonly used and preferred preserving solutions. Methods: Forty male Wistar albino rats were used in this study in four experimental groups. Group 1: Ringer Lactate (RL, Control) group, Group 2: HTK group, Group 3: UW group, and Group 4: AF group. A midline incision was performed, and the renal artery was isolated under ketamine and xylazine anesthesia. Solutions relevant for groups (cooled to + 4°C) were used for kidney perfusion. Nephrectomy was applied, and the removed kidneys were placed into + 4°C standard organ storage solution and stored at + 4° C for 12 hours. After 12 hours of storage, samples from the kidney tissues were fixed in 10% neutral buffered formalin. Histopathological, immunohistochemistry evaluation and apoptosis detection via TUNEL method were performed. Results: The results of the AF group were close to those of the UW and HTK groups. Tubular necrosis and vacuolization were high in the RL solution group when compared to the other ‎experimental groups. Immunohistochemistry staining for all three markers (TNF-alpha, IL-18, and iNOS) was decreased in the amniotic fluid group, similar to the UW and HTK groups. Also, the number of apoptotic cells was decreased in the AF group compared to control. Conclusions: UW, HTK, and AF had similar and higher protective effects compared to the RL solution. Thus, AF may be used as an inexpensive and readily available alternative natural tissue preservation solution.

Resumen Introducción: El trasplante de riñón es una opción de tratamiento que puede salvar la vida de pacientes con insuficiencia renal crónica. Preservar la viabilidad del órgano desde su extracción hasta el momento del trasplante en el receptor es uno de los factores principales que influyen en el éxito postrasplante. El tejido renal está expuesto a la isquemia después de la extracción del órgano del donante, lo cual da inicio a algunos eventos celulares. Existen estudios que indican que el líquido amniótico (LA) funciona como una solución de conservación para el hígado, pero aún se desconoce si sucede lo mismo con el riñón. El objetivo de este estudio es investigar la efectividad del LA como solución conservadora para los riñones de ratas, en comparación con la solución de Wisconsin (UW) y la solución de histidina-triptófano-cetoglutarato (HTK), que son los conservantes más utilizados y preferidos. Material y métodos: Se emplearon cuarenta ratas albinas macho de la cepa Wistar en este estudio, en cuatro grupos experimentales. Grupo 1: grupo solución de lactato sódico compuesta (LSC, Control); Grupo 2: grupo HTK; Grupo 3: grupo UW y Grupo 4: grupo LA. Habiendo aplicado anestesia con ketamina y xilazina, se realizó una incisión en la línea media y se aisló la arteria renal. Se utilizaron soluciones relevantes para grupos (enfriadas a + 4° C) para perfusión renal. Se realizó una nefrectomía, y los riñones extraídos fueron colocaron en una solución estándar de almacenamiento de órganos a + 4° C y se conservaron así durante 12 horas. Después de dicho periodo de almacenamiento, las muestras de los tejidos renales se fijaron en formalina tamponada neutra al 10%. Se llevaron a cabo una evaluación histopatológica e inmunohistoquímica y una detección de apoptosis mediante el método TUNEL. Resultados: Los resultados del grupo LA fueron cercanos a los de los grupos UW y HTK. La necrosis tubular y la vacuolización fueron más altas en el grupo de la solución LSC que en los otros grupos experimentales. La tinción inmunohistoquímica para los tres marcadores (TNF-alfa, IL-18 e iNOS) disminuyó en el grupo de líquido amniótico, similar a los grupos UW y HTK. Además, el número de células apoptóticas menguó en el grupo LA, en comparación con el de control. Conclusiones: UW, HTK y LA tuvieron efectos protectores similares y superiores en comparación con la solución LSC. Por lo tanto, el LA puede usarse como una solución alternativa de bajo costo para la preservación de tejidos naturales.

Effects of different swimming intensities on the bone properties of the tibia and femur of Wistar Rats in which knee rheumatoid arthritis was induced / Efectos de las diferentes intensidades de la natación en las propiedades óseas de la tibia y fémur de Ratas Wistar con artritis reumatoide inducida en rodillas

Rheumatoid arthritis (RA) is a disease triggered by environmental and genetic factors. Research suggests that physical exercise has benefits such as delaying functional disability. In vivo studies using experimental models of arthritis can provide useful information about these benefits. to analyze the effects that different intensities of aquatic physical exercise have on the proprieties of the bones in induced arthritis in knees of Wistar rats. Male Wistar adults rats (n=20) were divided into 5 groups: Group Control Arthritis (GCA) n=4, Group control Placebo (GCP) n=4, Group Low Physical Activity (GB) n=4, Group Moderate Physical Activity (GM) n=4 and Group Intense Physical Activity (GI) n=4. The physical activity groups got an intra-articular injection of Zymosam on the right knee; the GCA received saline solution in the right knee; the GCP was submitted to the stress of the needle. The animals were submitted to aquatic activity for 30 minutes, 4 times a week for 5 weeks, and the intensity of the exercise was determined by a weight placed on their back: GB=1 %, GM=5 %, GI=15 % of their body weight. It was observed that the group GB, and the groups that did not exercise GCA and GCP, gained more weight compared to the group GM. In relation to the bone mineral content of the tibia, there was a decrease in the GM group when compared to the GCP group, whereas in the tibial bone mineral density there was a decrease in the GM group compared to the GCP, GCA, GB. As for the area of the femur, the GI group presented an increase of it compared to the GB and GM groups. It is concluded that the high intensity exercises promote better results in bone properties.

La investigación sugiere que el ejercicio físico tiene beneficios como retrasar la discapacidad funcional de la artritis reumatoide. Los estudios in vivo que utilizan modelos experimentales de artritis pueden proporcionar información útil sobre estos beneficios. Se analizaron los efectos de las intensidades del ejercicio físico acuático sobre las propiedades de los huesos, en la artritis inducida en las rodillas de ratas Wistar. Las ratas Wistar macho adultas (n = 20) se dividieron en 5 grupos: grupo de control artritis (ACG) n = 4, grupo control placebo (CGP) n = 4, grupo de actividad física baja (GB) n = 4, grupo de actividad física moderada (GM) n = 4 y grupo de actividad física intensa (GI) n = 4. Los grupos de actividad física recibieron una inyección intraarticular de Zymosam en la rodilla derecha; el GCA recibió solución salina en la rodilla derecha; el CGP fue sometido a la tensión de una aguja. Los animales fueron sometidos a actividad acuática durante 30 minutos, 4 veces a la semana durante 5 semanas, y la intensidad del ejercicio se determinó mediante un peso colocado sobre su espalda: GB = 1 %, GM = 5 %, GI = 15 % de su peso corporal. Se observó que el grupo GB, y los grupos que no ejercitaron GCA y CGP, ganaron más peso en comparación con el grupo GM. En relación con el contenido mineral óseo de la tibia, hubo una disminución en el grupo GM en comparación con el grupo GCP, mientras que en la densidad mineral del hueso tibial hubo una disminución en el grupo GM en comparación con el GCP, GCA, GB. En cuanto al área del fémur, el grupo GI presentó un aumento en comparación con los grupos GB y GM. En conclusión el ejercicio de alta intensidad promueve mejores resultados en las propiedades óseas.

Marcadores morfológicos de hipoxia en el riñón fetal con insuficiencia placentaria tratado con neuro-EPO: estudio en ratas / Morphological markers of hypoxia in the fetal kidney with placental insufficiency treated with neuro-EPO: study in rats

RESUMEN Fundamento: la restricción del crecimiento intrauterino constituye una complicación del embarazo. Los recién nacidos con esta condición están expuestos a un mayor riesgo de morbimortalidad perinatal y postnatal. Objetivo: evaluar marcadores morfológicos de hipoxia en el desarrollo fetal y en el riñón, utilizando un modelo de insuficiencia placentaria tratado con eritropoyetina humana con bajo contenido de ácido siálico (neuro-Epo) en ratas. Métodos: se utilizaron tres grupos de ratas gestadas de la línea Wistar. Un grupo control (grupo I) y dos grupos experimentales (grupos II y III) con seis ratas cada uno. A las ratas de los grupos II y III se les realizó ligaduras de arterias uterinas en el día 16 de la gestación (E 16). Al grupo III desde E16 hasta E19 se le administró una dosis de 0,5 mg/kg/día de neuro-Epo por vía subcutánea y al grupo II se les administró placebo. En el día 20 de la gestación se pesaron los fetos y sus placentas. En el feto se midió la talla y los diámetros cefálicos. Las características morfométricas e histológicas en el riñón fetal se estudiaron con tinción de hematoxilina-eosina y PAS. Se realizó un análisis cualitativo histopatológico de sus tipos celulares. Resultados: los fetos con restricción del crecimiento intrauterino no mejoraron los marcadores de crecimiento. Se encontraron lesiones por hipoxia en el riñón fetal del grupo RCIU no tratado que mejoraron al administrar neuro-Epo. Conclusiones: la administración de neuro-Epo solo mostró efectos reparadores y protectores sobre alteraciones histológicas provocadas por la hipoxia en el riñón fetal.

ABSTRACT Foundation: intrauterine growth restriction constitutes a complication of pregnancy. Newborns with this condition are exposed to an increased risk of perinatal and postnatal morbidity and mortality. Objective: to evaluate morphological markers of hypoxia in fetal and kidney development, using a model of placental insufficiency treated with human erythropoietin with low sialic acid content (neuro-Epo) in rats. Methods: three groups of gestated rats from the Wistar line were used. A control group (group I) and two experimental groups (groups II and III) with six rats each. Rats of groups II and III had uterine artery ligation on day 16 of pregnancy (E 16). Group III from E16 to E19 was administered a dose of 0.5 mg / kg / day of neuro-Epo subcutaneously and group II was administered placebo. On the 20th day of gestation the fetuses and their placentas were weighed. The fetuses' size and cephalic diameters were measured. Morphometric and histological features in the fetal kidney were studied with hematoxylin-eosin staining and PAS. A qualitative histopathological analysis of their cell types was performed. Results: fetuses with intrauterine growth restriction did not improve growth markers. Hypoxia lesions were found in the fetal kidney of the untreated RCIU group that improved by administering neuro-Epo. Conclusions: the administration of neuro-Epo only showed reparative and protective effects on histological alterations caused by hypoxia in the fetal kidney.

Eficácia da estimulação elétrica com corrente russa após neurorrafia término-lateral do nervo fibular comum: análise eletroneuromiográfica e de força muscular / Eficacia de la estimulación eléctrica con la corriente rusa tras la neurorrafia término-lateral del nervio fibular común: análisis electroneuromiográfico y de fuerza muscular muscular / Efficacy of electrical Russian current stimulation after end-to-side neurorrhaphy of the common fibular nerve: electroneuromyography and muscle strength analysis

RESUMO Lesões de nervos periféricos levam a perda funcional elevada no tecido muscular. Assim, muitas pesquisas têm investigado técnicas cirúrgicas, como neurorrafias, e recursos terapêuticos, como eletroestimulação, para melhorar a funcionalidade de um músculo reinervado após lesão periférica. Este estudo tem como objetivo investigar os efeitos da eletroestimulação com corrente russa (2.500Hz, 4ms, 10 seg. de contração por 20 seg. de relaxamento, modulação de 10Hz e 100 Hz) na recuperação funcional após secção e neurorrafia término-lateral do coto distal do nervo fibular comum à face lateral do nervo tibial em ratos. Foram utilizados 25 ratos Wistar, machos, com 80 dias de vida, fornecidos pelo Biotério Central da Universidade Sagrado Coração (Bauru, SP, Brasil). Os animais foram divididos aleatoriamente em cinco grupos: grupo-controle Inicial (GCI), grupo-controle final (GCF), grupo experimental não tratado (GENT), grupo neurorrafia término-lateral com estimulação russa (GNTLER) e grupo-controle desnervado (GCD). A corrente russa foi iniciada cinco dias após neurorrafia e aplicada no músculo tibial cranial do GNTLER, 3 vezes por semana, totalizando 36 sessões. A estimulação elétrica foi eficaz para aumentar a amplitude e diminuir a latência do músculo reinervado, além de aumentar a força muscular em comparação ao GCD. Diante disso, conclui-se que a eletroestimulação de média frequência (corrente russa) foi eficiente na recuperação funcional do músculo tibial cranial após neurorrafia término-lateral do nervo fibular comum.

RESUMEN Las lesiones de los nervios periféricos ocasionan una elevada pérdida funcional en el tejido muscular. De esta manera, en muchos estudios se han investigado técnicas quirúrgicas, como neurorrafias, y recursos terapéuticos, como la electroestimulación, para mejorar la funcionalidad del músculo reinervado tras una lesión periférica. El presente estudio tiene como objetivo investigar los efectos de la electroestimulación con corrente rusa (2.500Hz, 4ms, 10 seg. de contracción por 20 seg. de relajación, modulación de 10Hz y 100Hz) en la recuperación funcional tras la sección y neurorrafia término-lateral del muñón distal del nervio fibular común en la parte lateral del nervio tibial en ratas. Se utilizaron 25 ratas Wistar, machos, con 80 días de vida, proporcionadas por el Biotério Central de la Universidade do Sagrado Coração (Bauru, SP, Brasil). Se dividieron aleatoriamente los animales en cinco grupos: grupo de control inicial (GCI), grupo de control final (GCF), grupo experimental no tratado (GENT), grupo de neurorrafia término-lateral con estimulación rusa (GNTLER) y grupo de control denervado (GCD). La corriente rusa se inició cinco días tras la neurorrafia, siendo que la aplicó al músculo tibial craneal del GNTLER 3 veces a la semana, con un total de 36 sesiones. La estimulación eléctrica se mostró efectiva para aumentar la amplitud y disminuir la latencia del músculo reinervado, además de aumentar la fuerza muscular en comparación con el GCD. Por lo tanto, se concluye que la estimulación eléctrica de frecuencia media (corriente rusa) fue eficaz en la recuperación funcional del músculo tibial craneal tras la neurorrafia término-lateral del nervio fibular común.

ABSTRACT Peripheral nerve injury leads to a high functional loss of muscle tissue. Thus, many studies have investigated surgical techniques, such as neurorraphies, and therapeutic resources, such as electrical stimulation, to improve the functionality of reinnervated muscle after peripheral injury. This study aims to investigate the effects of electrical stimulation with Russian Current (2,500Hz, 4ms, 10:20 sec contraction/relaxation, modulated at 10Hz and 100Hz) in the functional recovery after section and end-to-side neurorrhaphy of the peroneal nerve distal stump common to the lateral face of the tibial nerve in rats. In this study, 25 male Wistar rats with 80 days of life were used, provided by the Universidade Sagrado Coração (USC), Bauru, SP, Brazil. The animals were randomly divided into five groups: Initial Control Group (ICG), Final Control Group (FCG), Untreated Experimental Group (UEG), End-to-Side Neurorrhaphy with Russian Stimulation Group (ENRSG), and Denervated Control Group (DCG). The Russian Current was started 5 days after neurorrhaphy and applied to the cranial tibial muscle of the ENRSG, 3 times a week, totaling 36 sessions. We observed that the electrical stimulation with Russian Current (ENRSG) was effective to increase amplitude (mV) and to decrease the latency (ms) of the reinnervated muscle, besides increasing the muscle strength when compared with the denervated control group. Therefore, we concluded that the average frequency electrical stimulation (Russian current) was efficient in the functional recovery of the cranial tibial muscle after the end-lateral neurorrhaphy of the common fibular nerve.

Morfometría de corazón y pulmón en ratas Wistar infectadas con leptospira canícola durante la preñez / Heart and lung morphometry in Wistar rats infected with canine leptospira during pregnancy

RESUMEN Introducción: la leptospirosis es una zoonosis de amplia distribución mundial que ocasiona grandes pérdidas a la salud del hombre. Objetivo: determinar las alteraciones morfométricas de corazón y pulmón en ratas Wistar infectadas con leptospira canícola durante la preñez. Métodos: estudio descriptivo, observacional y transversal, en el Laboratorio de Investigaciones Biomédicas de la Universidad de Ciencias Médicas de Pinar del Río, desde septiembre 2016 hasta agosto 2018, en 120 crías de ratas Wistar posterior al sacrificio, cuyas madres, durante la gestación fueron inoculadas con cepas del serogrupoleptospira canícula. Se estudiaron las variables: sexo, peso, volumen de corazón y pulmones, longitud transversa, longitud sagital, y grosor del ventrículo izquierdo. Se realizó examen morfométrico con la utilización del software MOTIC, y la digitalización de las imágenes con una cámara MOTIC-AM 3 acoplada a un estereoscopio, ambos conectados a un ordenador para la recogida y análisis de los datos. Resultados: predominaron los machos con un 55,84 %, donde se observó en ambos sexos, disminución del peso y volumen del corazón. El promedio morfométrico de la longitud transversa, longitud sagital, y el grosor del ventrículo izquierdo del corazón disminuyó sus longitudes. No existieron diferencias en ambos sexos en relación al peso y volumen de ambos pulmones. Conclusiones: resultados similares, sin evaluar otros daños, pueden ocurrir en el hombre cuando se infecta con leptospirosis. Se debe incentivar el desarrollo de investigaciones donde se utilicen otras cepas de leptospiras, que permitan evaluar y evitar defectos en el desarrollo humano.

ABSTRACT Introduction: leptospirosis is a zoonosis of wide-ranging distribution worldwide that causes great losses to human health. Objective: to determine the morphometric changes of heart and lung in Wistar rats infected with canine leptospira during pregnancy. Methods: descriptive, observational and cross-sectional study carried out at Pinar del Río University of Medical Sciences, mainly by the Biomedical Research Laboratory, from September 2016 to August 2018, on 120 offspring of Wistar rats posterior to the slaughter, whose mothers, during gestation, were inoculated with strains of the canicula serogroup leptospira. The following variables were included in the study: sex, weight, heart and lung volume, crosswise length, sagittal length, and left ventricle thickness. Morphometric examination was performed with the use of MOTIC software and digitalization of the images with a MOTIC-AM 3 camera coupled to a stereoscope, both connected to a computer for data collection and analysis. Results: male sex predominated with 55.84%, where a decrease in weight and heart volume was observed in both genders. The morphometric average of crosswise length, sagittal length and the thickness of the left ventricle of the heart decreased its lengths. There were no differences in both sexes in relation to the weight and volume of both lungs. Conclusions: similar results, without evaluating other damages, can occur in men when infected with leptospirosis. The development of researches where other strains of leptospira can be used should be encouraged, in order to evaluate and avoid defects in human development.